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巨噬细胞胆固醇外流测试是一种用于评估巨噬细胞胆固醇代谢功能的重要检测项目,主要用于研究动脉粥样硬化、心血管疾病及相关代谢性疾病的发病机制。该测试通过测量巨噬细胞中胆固醇的外流效率,帮助评估药物或治疗手段对胆固醇代谢的影响。检测的重要性在于其为心血管疾病的研究和治疗提供了关键的实验数据,有助于开发新的靶向药物和治疗方法。
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巨噬细胞系(如RAW264.7、THP-1), 原代巨噬细胞, 动脉粥样硬化模型细胞, 高胆固醇血症模型细胞, 转基因巨噬细胞, 药物处理后的巨噬细胞, 炎症刺激的巨噬细胞, 氧化应激模型细胞, 自噬抑制或激活的巨噬细胞, 线粒体功能异常的巨噬细胞, 内质网应激模型细胞, 载脂蛋白A1处理的巨噬细胞, 高密度脂蛋白处理的巨噬细胞, 低密度脂蛋白处理的巨噬细胞, 磷脂转运蛋白处理的巨噬细胞, 基因敲除或过表达的巨噬细胞, 信号通路抑制或激活的巨噬细胞, 代谢综合征相关巨噬细胞, 糖尿病模型巨噬细胞, 衰老相关的巨噬细胞
放射性标记胆固醇外流法:使用放射性同位素标记胆固醇,测量其从巨噬细胞中外流的效率。
高效液相色谱法(HPLC):定量分析细胞内外的胆固醇含量。
荧光标记胆固醇外流法:利用荧光染料标记胆固醇,通过荧光显微镜或酶标仪检测外流效率。
Western Blot:检测胆固醇外流相关蛋白(如ABCA1、ABCG1、SR-B1)的表达水平。
实时荧光定量PCR(qPCR):分析胆固醇代谢相关基因的mRNA表达。
流式细胞术:测定细胞膜流动性及胆固醇分布。
ELISA:检测炎症因子和氧化应激标志物的释放水平。
细胞活力检测(MTT法):评估药物或处理对细胞存活率的影响。
脂质过氧化产物检测:通过比色法或荧光法测量脂质过氧化水平。
线粒体功能检测:通过JC-1染色或ATP含量测定评估线粒体活性。
自噬流检测:利用LC3-II/LC3-I比值或自噬标志蛋白评估自噬水平。
内质网应激标志物检测:测定GRP78、CHOP等蛋白的表达。
基因表达谱分析:通过RNA-seq或微阵列技术研究胆固醇代谢相关基因的表达变化。
免疫荧光染色:观察胆固醇外流相关蛋白的亚细胞定位。
质谱分析法:精确测定胆固醇及其代谢产物的含量。
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