信息概要
本检测服务针对细胞CRISPR实验,提供全面的基因编辑效果评估服务。产品介绍包括对CRISPR编辑效率、特异性及细胞反应的检测,旨在确保基因编辑的准确性和安全性。检测的重要性在于避免脱靶效应和细胞毒性,为科研和临床应用提供可靠数据支持。概括而言,服务涵盖从DNA到蛋白质的多层次检测,确保实验结果的全面性和可靠性。
检测项目
基因编辑效率, 脱靶效应, 细胞存活率, 突变类型, 编辑位点验证, 表达水平变化, 蛋白质表达, 细胞形态, 增殖率, 凋亡率, 细胞周期, 毒性评估, 转染效率, CRISPR RNA设计验证, Cas蛋白活性, 基因组DNA完整性, RNA表达水平, 表观遗传变化, 细胞功能 assay, 免疫反应, 代谢变化, 信号通路激活, 细胞分化, 肿瘤形成潜力, 基因功能恢复, 敲除效率, 敲入效率, 同源重组效率, 非 homologous end joining 效率, 编辑特异性
检测范围
HEK293细胞, HeLa细胞, MCF-7细胞, A549细胞, iPSC, ESC, 神经元细胞, 肝细胞, 心肌细胞, 内皮细胞, 成纤维细胞, T细胞, B细胞, NK细胞, 巨噬细胞, 间充质干细胞, 癌症细胞系, 原代人类细胞, 小鼠细胞, 大鼠细胞, Cas9系统, Cas12a系统, Cas13系统, dCas9系统, nickase Cas9, high-fidelity Cas9, CRISPR激活, CRISPR抑制, base editing, prime editing
检测方法
PCR测序:用于检测基因编辑位点的序列变化和突变类型,提供高精度编辑验证。
Western Blot:检测特定蛋白质的表达水平和修饰,评估编辑后蛋白功能。
流式细胞术:分析细胞表面标记、细胞内蛋白和细胞周期,提供多参数细胞分析。
细胞计数试剂盒 assay:测量细胞活力和增殖能力,快速评估细胞健康状态。
MTT assay:评估细胞代谢活性和毒性,间接反映编辑对细胞的影响。
彗星 assay:检测DNA损伤和修复情况,评估编辑过程中的基因组稳定性。
T7E1 assay:特异性检测 indel mutations 在编辑位点,简单快速验证编辑效果。
深度测序:高通量测序编辑区域以评估编辑效率和脱靶效应,提供全面数据支持。
荧光显微镜:观察细胞形态、荧光标记和编辑效果,直观显示细胞变化。
ELISA:定量测量蛋白质浓度和细胞因子水平,精确分析蛋白表达。
qRT-PCR:精确测量RNA表达水平的变化,评估编辑对转录的影响。
细胞凋亡 assay:如Annexin V staining,检测细胞凋亡率,评估编辑安全性。
细胞周期 analysis:通过流式细胞术分析细胞周期分布,了解编辑对细胞增殖的影响。
脱靶效应预测软件:使用计算工具预测潜在脱靶位点,辅助实验设计。
体内实验:在动物模型中验证编辑效果和安全性,提供体内数据支持。
检测仪器
PCR仪, 测序仪, 流式细胞仪, 显微镜, 离心机, 电泳仪, 凝胶成像系统, 酶标仪, 细胞培养箱, 生物安全柜, 超净工作台, 低温离心机, 实时荧光定量PCR仪, 蛋白质印迹系统, 细胞计数仪