信息概要
激酶选择性检测是第三方检测机构提供的关键服务，用于评估化合物对特定激酶的抑制或激活作用，广泛应用于药物发现和开发中。该检测通过分析化合物与多种激酶的相互作用，确保其选择性，避免脱靶效应，从而优化先导化合物、减少潜在副作用、提高药物安全性和疗效。检测的重要性在于为科研和制药行业提供可靠的数据支持，加速药物研发进程，并降低临床失败风险。本服务涵盖全面的激酶谱分析，帮助客户深入理解化合物机制，推动精准医疗发展。
检测项目
IC50值, Ki值, 抑制百分比, 激活百分比, 选择性指数, 结合常数, 解离常数, 酶活性, 底物Km值, 最大速度Vmax, 抑制剂IC90, 激动剂EC50, 时间依赖性抑制, 浓度响应曲线斜率, 竞争性抑制Ki, 非竞争性抑制Ki, 反竞争性抑制Ki, 热稳定性Tm值, pH依赖性活性, 温度Optimum, 镁离子需求, ATP Km值, 变构调节常数, 磷酸化效率, 自动磷酸化率, 交叉反应性百分比, 特异性得分, 重现性CV值, 准确度偏差, 精密度RSD, 线性范围, 检测限LOD, 定量限LOQ, 半数最大效应浓度, 动力学参数Kcat, 底物特异性, 金属离子影响, 辅因子需求, 变构效应强度, 磷酸化状态分析
检测范围
受体酪氨酸激酶, 非受体酪氨酸激酶, 丝氨酸/苏氨酸激酶, 脂质激酶, 糖原合成酶激酶, 细胞周期蛋白依赖性激酶, 丝裂原活化蛋白激酶, 蛋白激酶A, 蛋白激酶B, 蛋白激酶C, 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶, Janus激酶, Src家族激酶, Abl激酶, EGFR激酶, VEGFR激酶, PDGFR激酶, 胰岛素受体激酶, mTOR激酶, AMPK激酶, PKA激酶, PKC激酶, PKG激酶, CK1激酶, CK2激酶, GSK3激酶, CDK1激酶, CDK2激酶, MAPK1激酶, MAPK2激酶, JNK激酶, p38激酶, ERK1激酶, ERK2激酶, Raf激酶, MEK激酶, TAK1激酶, IKK激酶, PKR激酶, DAPK激酶
检测方法
荧光偏振法：利用荧光标记分子的偏振光变化检测分子结合和相互作用。
放射性检测法：通过测量放射性同位素标记的ATP掺入来量化激酶活性。
酶联免疫吸附 assay：使用特异性抗体检测磷酸化蛋白水平，适用于高通量筛选。
质谱法：分析磷酸化肽段以确定激酶作用位点和修饰状态。
表面等离子体共振：实时监测分子间结合动力学和亲和力。
热位移 assay：测量蛋白热稳定性变化以推断化合物结合效应。
细胞基 assay：在活细胞环境中测试激酶抑制或激活，模拟生理条件。
高通量筛选：自动化平台进行大规模化合物测试，提高效率。
Western blot：通过免疫印迹技术检测磷酸化蛋白表达和活性。
荧光共振能量转移：基于荧光能量转移检测分子间近距离相互作用。
等温滴定 calorimetry：测量结合过程中的热变化，提供热力学参数。
核磁共振 spectroscopy：分析分子结构和动力学，用于详细机制研究。
X射线晶体学：确定激酶与化合物复合物的三维结构。
电泳 mobility shift assay：检测磷酸化 induced mobility变化，评估酶活性。
激酶活性 assay：直接测量酶促反应速率，使用 colorimetric 或 fluorometric 底物。
流式细胞术：在单细胞水平分析激酶活性和信号传导。
微阵列技术：同时测试多种激酶，提供全局选择性谱。
化学发光 assay：通过发光信号检测激酶活性，灵敏度高。
免疫沉淀 assay：分离特定激酶复合物进行后续分析。
生物层干涉技术：实时监测分子结合，无需标记。
检测仪器
荧光显微镜, 质谱仪, 高效液相色谱仪, 酶标仪, 离心机, 恒温培养箱, 振荡器, 电泳装置, Western blot系统, PCR仪, 流式细胞仪, 表面等离子体共振仪, 微量板读数器, 自动化液体处理机器人, 核磁共振仪, 等温滴定 calorimeter, X射线衍射仪, 化学发光成像系统, 荧光光谱仪, 紫外可见分光光度计, 液相色谱-质谱联用仪, 气相色谱-质谱联用仪, 细胞培养箱, 蛋白纯化系统, 实时荧光定量PCR仪
