旗下实验室荣誉资质
CMA资质认定证书
CNAS认可证书
技术概述
乳酸化修饰(Lactylation)是近年来生命科学领域备受关注的一种新型蛋白质翻译后修饰方式,最早于2019年在组蛋白上被系统发现。该修饰以细胞代谢中间产物乳酸为底物,在特定酶系催化下,将乳酸酰基团共价连接到蛋白质赖氨酸残基上,从而形成赖氨酸乳酸化位点。作为一种连接细胞代谢状态与基因表达调控的重要分子桥梁,乳酸化修饰参与了转录调控、免疫应答、细胞分化、肿瘤微环境重塑等多种关键生物学过程。
组织乳酸化修饰检测是针对动物或植物组织样本中乳酸化修饰水平、修饰位点及修饰分布情况进行定性或定量分析的专业技术服务。随着代谢重编程与表观遗传交叉研究的不断深入,组织乳酸化修饰检测已成为肿瘤代谢、免疫微环境、炎症反应、神经退行性疾病等研究领域的重要分析手段。通过检测组织中总乳酸化水平、组蛋白特定位点乳酸化程度以及非组蛋白乳酸化谱图,研究人员可以揭示乳酸堆积与疾病进展之间的分子关联,为机制研究和潜在干预靶点的发现提供数据支撑。
本服务依托高通量蛋白质组学技术与经典免疫检测平台,可为科研人员提供覆盖广谱筛查、位点鉴定与定量分析的一站式组织乳酸化修饰检测解决方案,满足基础研究、临床转化及药物开发等多层次需求。
检测样品
本服务接受的样品类型涵盖多种组织来源,具体包括以下类别,客户可根据实验目的选择合适的样品形式:
- 动物新鲜组织:肿瘤组织、肝组织、脑组织、心组织、肾组织、肺组织、脾组织、脂肪组织、骨骼肌等;
- 临床组织样本:手术切除组织、穿刺活检组织、冷冻组织样本等;
- 石蜡包埋组织(FFPE)及石蜡切片;
- 冰冻组织切片;
- 植物组织:叶片、根、茎、种子、果实等;
- 细胞样品:贴壁或悬浮细胞沉淀(可作为组织检测的平行对照);
- 组织裂解液、组织蛋白提取物等预处理样品。
为保证检测结果的准确性与重复性,建议新鲜组织取样后迅速用液氮速冻或置于干冰运输,避免反复冻融;样品用量一般为20-100毫克,具体需求视检测项目和方法而定。石蜡切片建议提供厚度适宜的连续切片若干张,并附上完整的病理信息。所有样品送检前请详细标注样品名称、取样时间、保存条件及检测需求,以便实验方案的科学设计。
检测项目
组织乳酸化修饰检测服务内容丰富,可根据研究目的灵活组合,主要包括以下几类:
- 组织总乳酸化修饰水平检测:利用广谱乳酸化抗体(Pan-Kla)评估组织样品中整体乳酸化修饰丰度;
- 组蛋白位点特异性乳酸化检测:包括H3K18la、H4K12la、H3K9la、H3K14la、H3K56la等常见组蛋白乳酸化位点的定量分析;
- 非组蛋白乳酸化修饰检测:针对代谢酶、转录因子、信号转导蛋白等非组蛋白底物的乳酸化水平分析;
- 乳酸化修饰位点全景鉴定:基于修饰组学策略大规模鉴定组织中乳酸化修饰位点和修饰蛋白;
- 乳酸化修饰定量差异分析:比较不同处理组、疾病组与对照组之间乳酸化修饰的动态变化;
- 组织切片乳酸化免疫染色:通过免疫组化或免疫荧光对组织原位乳酸化分布进行半定量分析;
- 乳酸化相关代谢指标联合检测:可搭配乳酸含量、乳酸脱氢酶活性等指标进行关联分析。
客户可根据实验设计选择单一项目检测或多项组合检测,组合检测有助于从整体水平、位点水平和空间分布水平多维度刻画组织乳酸化修饰特征,形成更加完整的科研数据链条。
检测方法
针对不同的检测目的与样品类型,本服务采用多种成熟可靠的检测方法,确保结果的科学性与可信度:
- 蛋白质免疫印迹法(Western Blot):利用Pan-Kla抗体或位点特异性抗体检测组织总乳酸化及特定位点乳酸化水平,操作成熟、结果直观,是实验室最常用的验证手段;
- 免疫组织化学法(IHC):对组织切片进行乳酸化染色,观察乳酸化修饰在组织中的定位分布与表达强弱,适合临床样本的原位分析;
- 免疫荧光法(IF)与共聚焦成像:实现乳酸化修饰的亚细胞定位观察,可与其他标志物进行共染分析;
- 酶联免疫吸附法(ELISA):适用于批量组织样品中乳酸化水平的快速定量筛选;
- 液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS):结合乳酸化修饰亲和富集策略,实现高通量乳酸化位点鉴定与相对定量,是修饰组学研究的核心方法;
- 靶向定量质谱(PRM/MRM):针对特定乳酸化肽段进行精确靶向定量,适用于大样本队列验证;
- 数据库检索与生物信息学分析:对质谱鉴定结果进行蛋白功能注释、通路富集、修饰位点上下游分析等深度挖掘。
整个实验流程包括样品前处理、蛋白提取与定量、修饰富集或抗体孵育、信号检测与数据采集、结果分析与报告撰写等环节。实验过程设置严格的质控标准,确保数据的准确性和可重复性。
检测仪器
本服务依托完善的仪器设备平台开展组织乳酸化修饰检测,主要仪器配置如下:
- 高分辨率液质联用系统(Orbitrap系列、Q-TOF系列):用于乳酸化修饰肽段的深度鉴定与定量分析;
- 三重四极杆质谱仪:用于PRM/MRM靶向定量分析;
- 超高效液相色谱仪(UHPLC):实现多肽的高效分离;
- 电泳与转膜系统:配套蛋白质免疫印迹实验的完整设备链;
- 化学发光成像系统:用于Western Blot条带的高灵敏度采集;
- 全自动组织处理与染色系统:保证免疫组化染色的标准化与一致性;
- 激光共聚焦显微镜与荧光显微镜:用于免疫荧光样品的高分辨率成像;
- 多功能酶标仪:用于ELISA检测与蛋白浓度测定;
- 组织研磨仪、低温超声破碎仪:保障组织样品的高效前处理。
仪器平台定期进行校准与维护,操作人员均经过系统培训并具备丰富的修饰组学与免疫检测经验,为高质量数据产出提供硬件与技术双重保障。
应用领域
组织乳酸化修饰检测在多个生命科学与医学研究领域具有广泛应用价值:
- 肿瘤代谢研究:解析肿瘤组织中 Warburg 效应驱动的乳酸堆积与组蛋白乳酸化介导的基因表达重编程之间的关系,探索代谢-表观遗传调控轴在肿瘤发生发展中的作用;
- 免疫微环境研究:研究肿瘤相关巨噬细胞、T细胞等免疫细胞中乳酸化修饰对极化状态与免疫功能的影响,为免疫治疗提供新思路;
- 炎症与感染研究:探讨炎症模型组织中乳酸化修饰的动态变化及其在炎症因子转录调控中的功能;
- 心血管疾病研究:分析心肌缺血、心力衰竭等模型组织中乳酸化修饰的改变及潜在调控机制;
- 神经科学研究:关注脑组织中乳酸代谢与乳酸化修饰在神经退行性疾病、脑损伤修复中的作用;
- 代谢性疾病研究:覆盖脂肪肝、糖尿病、肥胖等代谢紊乱相关组织的乳酸化修饰特征分析;
- 植物科学研究:研究植物在逆境胁迫下乳酸化修饰的响应规律,助力作物抗逆机制解析;
- 药物研发与筛选:评估候选药物对组织乳酸化修饰水平的影响,为药效评价与作用机制研究提供参考。
常见问题
问题一:组织乳酸化修饰检测的检测周期是多久?
组织乳酸化修饰检测的周期一般为7-15个工作日。实际交付时间会受到多方面因素的影响:首先,检测项目的数量与类型会直接影响周期长短,例如仅进行Western Blot总乳酸化水平检测通常耗时较短,而涉及修饰组学质谱鉴定、生信分析或免疫组化染色的多项目组合则需更长时间;其次,样品数量越多,前处理与上机检测的排队时间相应延长;再次,方法复杂程度也是重要因素,靶向定量质谱与大样本队列分析通常需要额外的方法学建立时间;此外,若客户对报告内容有特殊定制化需求或需要加急处理,也可提前沟通安排,加急服务可在双方确认的时间节点内完成交付。
问题二:组织乳酸化修饰检测的检测价格是多少?
组织乳酸化修饰检测的价格需根据具体检测方案进行评估,无法一概而论。影响价格的主要因素包括:检测项目的种类与数量,例如单项Western Blot检测与修饰组学全景鉴定的复杂程度不同,成本投入也差异明显;所采用的检测方法,免疫类方法与高分辨质谱类方法的试剂耗材和机时成本不同;样品数量与类型,批量样品或特殊样品(如石蜡切片、微量穿刺组织)的前处理成本会有所区别;检测周期的要求,加急服务会涉及相应的时间成本。建议客户在送检前与我们联系,说明研究目的、样品情况与检测需求,我们将安排专业技术人员进行方案评估并提供详细报价信息。
问题三:组织乳酸化修饰检测测试需要什么资质?
我们旗下拥有CMA和CNAS资质,检测能力范围覆盖多项生物样品分析相关领域,可以为客户的相关检测需求提供专业支持。在技术团队方面,我们拥有一支由分析化学、蛋白质组学与分子生物学背景人员组成的专业队伍,具备丰富的翻译后修饰检测项目经验;在设备方面,实验室配置了高分辨质谱、色谱分离及免疫检测等多类精密仪器,并建立了规范的质量控制流程;在管理方面,实验室遵循标准化运行体系,从样品接收、实验操作到数据审核均有完善的记录与追溯机制,全面保障检测数据的可靠性与科学性。
问题四:组织样品应如何采集、保存与运输?
组织样品的规范处理对检测结果的准确性至关重要。采集时应遵循快速取材原则,建议在取样后立即用预冷的生理盐水或PBS冲洗去除血液等杂质,随后用吸水纸吸干水分;新鲜组织应迅速置于液氮中速冻或存放于-80℃冰箱,避免反复冻融导致蛋白降解。运输时请使用足量干冰保持低温环境,并选择冷链物流方式寄送。石蜡切片样品常温运输即可,但需避免高温与潮湿环境。样品送检时请附上样品清单,注明样品类型、数量、保存条件及实验分组信息,以便合理安排检测流程。
问题五:Western Blot检测与质谱检测乳酸化修饰有什么区别,应如何选择?
两种方法各有优势,适用场景不同。Western Blot检测基于特异性抗体,适合检测组织总乳酸化水平或已知的特定组蛋白位点(如H3K18la)的表达变化,具有成本较低、周期较短、结果直观的特点,适合机制验证类研究;质谱检测则不依赖抗体,可大规模、无偏地鉴定组织中的乳酸化修饰蛋白与修饰位点,并能提供相对定量信息,适合探索性研究与修饰组学全景分析。实际研究中常将两者结合使用:先通过质谱进行广谱筛查发现候选位点,再利用Western Blot或靶向质谱在大样本中进行验证,从而形成完整的证据链。客户可根据研究目的、样品数量与预算情况选择合适的检测策略。
问题六:检测报告中包含哪些内容,是否提供数据解读支持?
检测报告内容因项目类型而异。免疫类检测报告通常包括实验方法描述、代表性结果图(如Western Blot条带图、IHC染色图、荧光成像图)、灰度统计或半定量分析结果及简要结果说明;修饰组学质谱检测报告则包含质谱原始数据、乳酸化位点鉴定结果列表、定量差异分析结果、修饰蛋白功能注释与通路富集分析等模块。对于所有检测项目,我们均提供售后技术支持,客户如对报告数据存在疑问,可与我们的技术团队沟通,获得专业解答。如需进一步的生物信息学深度分析或实验方案优化建议,也可在项目开展前后与我们充分讨论。
问题七:如果样品量较少或为珍贵临床样本,是否可以进行检测?
可以。针对微量样品与珍贵临床样本,我们提供低起始量适配的检测方案。实验前会根据样品实际数量与类型进行可行性评估,并优化前处理流程以最大限度降低样品消耗。例如穿刺活检组织可通过微量蛋白提取结合高灵敏度质谱或Western Blot优化流程完成检测;石蜡切片样品可采用组织芯片或切片染色的方式进行原位分析。建议客户在送检前先与技术顾问沟通样品的具体情况,包括组织重量、切片数量、保存年限等信息,我们将据此推荐最合适的检测方法并制定个性化的实验方案,确保在有限样品条件下获得可靠的检测数据。