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技术概述
抗感染药物高通量筛选测试是一种将自动化液体处理系统、微孔板检测技术与现代微生物学、细胞生物学方法相结合的高效药物评价技术。该技术以96孔板、384孔板等微孔板为实验载体,通过自动化设备完成样品稀释、加样、孵育和检测等环节,可在短时间内对成千上万个化合物或样品进行抗细菌、抗真菌、抗病毒等活性评价,大幅提升了抗感染药物发现的效率与通量。
随着细菌耐药性问题日益严峻,多重耐药菌、广泛耐药菌的不断出现对公共卫生构成重大威胁,新型抗感染药物的研发需求愈发迫切。传统的药物筛选方法依赖人工操作,通量低、周期长、人力成本高,难以满足大规模化合物库初筛的需求。高通量筛选技术以其快速、微量、自动化、标准化的特点,成为抗感染新药研发链条中不可或缺的核心环节,广泛应用于初筛、复筛、活性确证以及作用机制研究等多个阶段。
抗感染药物高通量筛选测试通常以抑菌率、生长抑制曲线、最小抑菌浓度(MIC)等作为核心评价指标,并结合荧光、化学发光、比色等检测信号,实现数据采集的客观化与定量分析。同时,借助专业的数据管理系统,筛选结果可被快速处理、统计和可视化,为后续的构效关系分析和候选药物优化提供可靠的数据支撑。
检测样品
抗感染药物高通量筛选测试适用的样品类型广泛,涵盖化学合成、天然产物、生物技术来源等多种来源的候选物质,主要包括:
- 合成小分子化合物库:包括新化学实体、化合物骨架库、已知药物衍生物等;
- 天然产物提取物:植物提取物、微生物发酵产物、海洋生物提取物等;
- 中药及中药复方样品:单味中药提取物、有效部位、复方制剂等;
- 多肽与蛋白类样品:抗菌肽、重组蛋白、抗体及其功能片段等;
- 核酸类药物:反义寡核苷酸、siRNA、适配体等;
- 纳米材料及新型抗菌制剂:纳米载药体系、抗菌高分子材料、医用抗菌涂层浸提液等;
- 已上市药物及老药新用候选品种:用于新适应症拓展或联合用药研究。
检测项目
依托完善的技术平台,抗感染药物高通量筛选测试可覆盖多种病原体和多种活性评价维度,常见检测项目包括:
- 抗细菌活性筛选:涵盖革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、标准菌株及临床分离株的抑菌活性评价;
- 抗真菌活性筛选:针对念珠菌、曲霉菌、隐球菌等常见病原真菌的抑制活性测试;
- 抗病毒活性筛选:基于细胞模型的病毒复制抑制试验、细胞病变效应(CPE)抑制试验等;
- 最小抑菌浓度(MIC)测定与最小杀菌浓度(MBC)测定;
- 抗耐药菌活性筛选:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、产超广谱β-内酰胺酶菌、碳青霉烯耐药菌等;
- 生物膜抑制与清除活性评价;
- 细菌生长曲线与杀菌动力学(时间-杀菌曲线)分析;
- 联合用药协同作用评价:包括联合抑菌指数(FICI)测定;
- 样品细胞毒性评价:宿主细胞毒性检测与选择性指数计算;
- 作用机制初步研究:如细胞膜完整性检测、细菌形态学观察、靶点酶活性抑制分析等。
检测方法
抗感染药物高通量筛选测试根据检测对象与检测目的的不同,采用多种成熟方法组合的策略,确保结果的准确性与可重复性:
微量肉汤稀释法是目前应用最广泛的抗菌活性高通量检测方法,将菌液与系列稀释的样品在微孔板中混合孵育,通过酶标仪读取吸光度,判断微生物生长抑制情况,可直接获得抑菌率与MIC值,适合大批量样品的初筛与复筛。
荧光与化学发光检测法利用荧光探针或发光底物指示微生物的活性状态,信号灵敏度高、动态范围宽,可在384孔甚至更高密度微孔板上实现超高通量筛选,显著缩短检测时间、降低样品用量。
比色法通过指示剂颜色变化反映微生物代谢活性,常用显色底物和氧化还原指示剂等,操作简便、结果直观,便于自动化判读与数据量化。
细胞病变抑制法主要用于抗病毒活性筛选,通过观察病毒感染后宿主细胞的形态变化,或利用报告基因系统定量评价样品对病毒复制的抑制作用,可同时评估样品对宿主细胞的影响。
高内涵成像分析结合自动化显微成像与图像分析算法,可在单细胞水平上获取细菌形态、生物膜结构、细胞感染状态等多维度信息,为活性确证与机制研究提供更丰富的数据支持。
所有检测方法均设置阳性药对照、阴性对照与空白对照,并按照标准化操作规程执行,确保每批次数据的可靠性与不同批次之间的可比性。
检测仪器
为保障高通量筛选的自动化与精准化,平台配备了系列先进的检测仪器与设备,主要包括:
- 自动化液体处理工作站:完成样品梯度稀释、试剂分装与微孔板加样,降低人为操作误差;
- 多功能微孔板检测仪(酶标仪):支持吸光度、荧光、化学发光、荧光偏振等多种检测模式;
- 高内涵细胞成像分析系统:用于细胞与微生物的自动化成像及图像定量分析;
- 自动菌落计数仪与抑菌圈测量系统:实现平板结果的快速、客观判读;
- 厌氧培养系统、二氧化碳培养箱、恒温摇床等培养设备:满足不同病原体的培养条件需求;
- 二级生物安全柜及相应等级的生物安全实验设施:保障操作人员与实验环境安全;
- 实时荧光定量PCR仪等分子检测设备:用于病原体定量、耐药基因分析等辅助研究;
- 数据管理与统计分析系统:完成海量筛选数据的存储、处理、拟合与可视化呈现。
应用领域
抗感染药物高通量筛选测试的应用领域十分广泛,贯穿药物研发与相关产业的多个环节:
- 制药企业与药物研究机构:用于新型抗生素、抗真菌药、抗病毒药物的发现与候选化合物优化;
- 高校及科研院所:支撑感染性疾病相关基础研究、课题攻关与人才培养;
- 中药与天然药物开发:系统评价中药材、提取物及组方的体外抗菌抗病毒活性;
- 老药新用研究:快速筛选具有抗感染新用途的已上市药物或候选分子;
- 抗菌材料与日化产品开发:抗菌涂层、医用敷料、消毒剂、防腐剂等产品的功效评价;
- 食品与农业领域:食品防腐、植物病原菌防治等相关的活性物质筛选;
- 临床检验与疾控研究:临床分离菌株的药物敏感性分析、耐药机制研究等。
常见问题
问题一:抗感染药物高通量筛选测试的检测周期是多久?
抗感染药物高通量筛选测试的检测周期一般为7-15个工作日。具体周期会受到多种因素的影响,包括检测项目的数量与复杂程度、样品数量、所用菌株或细胞模型的培养时间、是否需要进行复筛或数据补充验证等。如果客户有明确的交付时间要求,也可以与实验室沟通安排加急处理,我们将根据实验排期与技术方案评估并尽量满足您的时效需求。
问题二:抗感染药物高通量筛选测试的检测价格是多少?
抗感染药物高通量筛选测试的费用与多个因素密切相关,主要包括所选检测项目的类型与数量、采用的检测方法、筛选通量规模、样品数量、涉及的菌株或细胞种类、检测周期以及是否需要加急服务等。不同客户的实验需求差异较大,具体费用需在明确技术方案后才能准确核算。欢迎联系我们的技术团队详细沟通需求,我们将为您提供专业的方案设计与针对性的报价服务。
问题三:抗感染药物高通量筛选测试需要什么资质?
我们旗下拥有CMA和CNAS资质,检测能力范围覆盖微生物、药物活性评价等多个领域,可为抗感染药物高通量筛选测试提供规范的技术支撑。同时,我们拥有经验丰富的专业技术团队和完善的仪器设备体系,实验过程严格按照标准化操作规程和质量管理体系运行,确保检测数据科学、准确、可靠,充分满足客户在科研与研发场景下的数据要求。
问题四:抗感染药物高通量筛选测试可以使用哪些菌株?
测试通常优先选用国内外公认的标准菌株,以保证结果的可比性与权威性,包括金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、白色念珠菌等常见菌种。针对耐药菌研究需求,也可选用MRSA、产超广谱β-内酰胺酶菌等临床常见耐药菌株。如客户自行提供临床分离株,需提供菌株来源与相关背景信息,并确保其符合生物安全管理规定。具体可测试的菌种范围可提前与技术团队确认。
问题五:送检样品有哪些要求?
样品可以化合物干粉、溶液、提取物等多种形式送检。建议客户提供样品的基本信息,包括名称或编号、纯度、溶解性、建议浓度或溶解溶剂、储存条件等。固体样品一般需提供足量以满足多浓度梯度测试需求;液体样品需注明浓度与溶剂类型,并避免使用对微生物生长有明显影响的溶剂体系。样品应使用密封良好的容器包装,随附送检单,以便实验室准确安排实验并保障结果的有效性。
问题六:筛选完成后可以获得哪些实验结果?
实验完成后,客户可获得完整的实验报告,内容通常包括实验方法与流程、所用菌株及培养条件、样品浓度梯度设置、各浓度下的抑菌率或生长抑制数据、MIC或MBC结果、阳性和阴性对照数据以及结论与分析等。对于复筛或机制研究项目,还可提供生长曲线、杀菌动力学曲线、联合用药协同作用分析等扩展数据,帮助客户全面了解样品的体外科研价值与应用潜力。
问题七:高通量筛选与常规药敏试验有什么区别?
常规药敏试验主要针对单个或少量样品进行药物敏感性测定,操作以手工为主,通量有限,适用于临床检验或小规模验证。而高通量筛选以自动化设备和微孔板技术为核心,可在同样时间内完成成百上千个样品的测试,并配合数据系统进行批量结果分析,具有效率高、样品用量少、成本低、数据标准化程度高等优势,特别适合化合物库大规模初筛以及抗感染药物研发早期的活性发现阶段。两者在药物研发的不同阶段互为补充,共同支撑候选药物的发现与确证。